KEMİK DOKUSU VE DEKALSİFİKASYON
Kemiğin mineral içeriği nedeni ile yumuşak dokular için kullanılan yöntemlerin modifikasyonlarının uygulanması gereklidir. En uygun teknik, parçanın ebatı ve yapısı, amaç, zaman ve elde mevcut olan aletlere göre değişebilmektedir.
Kemik ve patolojik olarak kalsifiye olmuş yumuşak dokuların genellikle kesit almadan önce kalsiyum tuzlarının uzaklaştırılması gerekirken dekalsifiye edilmemiş kemiklerin ve dişlerin preperasyonunun özel yöntem ve aletlerle yapılması mümkündür. Herhangibir yöntemle dekalsifikasyon başlamadan önce, dokular iyice tesbit edilmelidir. Aynı anda dokuyu tespit ettiği ve dekalsifiye ettiği farzedilen asit- fiksatif karışımları tatmin edici değildir. Histolojik araştırma için seçilen kemik hemen ince parçalara ayrılmalıdır. Bu iki nedenden dolayı gereklidir.
• Dens doku içine fiksatifin girişine izin vermek için,
• Dekalsifiye için gerekli süreyi azaltmak için (çünkü asit çözeltilerdeki uzun süreli immersiyon daha sonraki boyamayı ciddi biçimde zayıflatır).
3-5 mm’lik kemik parçaları ince diş testeresi ile motorlu testere ile kolaylıkla kesilebilir. Hangi yöntem kullanılırsa kullanılsın dokunun kesit yüzeyinde veya daha derininde küçük kemik parçaları, kıkırdak veya yumuşak dokular birikecektir. Mikroskopik olarak kemik tozları 2 formda görülebilir. Birincisi, kesitin kenarlarında çok sık rastlanan kemik veya kıkırdak kıymıkları; diğeri ise 200-700 µm çapında yuvarlak döküntüler şeklinde az rastlanan bir artifarktır. Kemik tozlarının hiç oluşmaması pek mümkün değildir ancak keskin testereler kullanılarak kemiği fazla hırpalamadan azaltılabilir.
%10’luk nötral formal–salin dekalsifikasyondan önce yeterlidir. Yassı, sert kemikler en azından 48 saat ya da daha fazla fikse edilmelidir. Dokuları radyoopak yaparak , dekalsifikasyon için bir test olan x-ray kullanımını da engellese de formal–sublimat da primer fiksatif olarak tavsiye edilmektedir. Acil kesite gereksinim varsa fiksasyon kısa olmalıdır ve çok ince kemik parçaları (2-3 mm) 600C’de %10’luk formal–salinle 2 saate uygun biçimde fikse olabilir.
Eğer kemikteki ve diğer dokulardaki kalsiyum tuzları gösterilmek istenirse tüm asit çözeltilerin kullanılmasından kaçınılması gereklidir ve fiksasyon nötral formalinde veya alkolde yapılmalıdır. Kemik blokları, diğer bloklarla birlikte tespit edilmemelidir. Çünkü kopan kemik parçaları, yumuşak dokuları zedeleyebilir.
DEKALSİFİKASYON: Birçok dekalsifikasyon sıvısı vardır. Tatmin edici bir dekalsifikasyon sıvısı :
• Kalsiyum tuzlarını tamamen uzaklaştırmalı
• Hücrelerin ve bağ dokusunda az büzülme oluşturmalı
• Boyama reaksiyonlarına zararlı etkilerinin az olması
• Bu kriterlere ilave olarak, dekalsifikasyon hızı da histopatolojide önem taşır.
Dokuların dekalsifikasyonu sırasında ajitasyonun, kalsiyum tuzlarının uzaklaştırılması hızında herhangibir önemli fark olup olmadığına dair şüpheler vardır. Bazı araştırıcılar periyodik çalkalamaların veya mekaniksel ajitasyonun dekalsifikasyonunu hızlandırdığını ileri sürmüşlerdir. Dekalsifikasyonu hızlandırmak için ısının kullanımında dikkatli olunmalıdır. 370 C nin üstü ısılar sadece acil durumda kullanılmalıdır. Dekalsifikasyon sıvısını, dekalsifikasyon boyunca 25 C’lik benmaride tutulmasını da önerilmektedir.
Dekalsifikasyon sıvısı, dokudan en azından 50-100 kat fazla hacimde olmalıdır. Bloklar dekalsifikasyon sıvısından süreç tamamlanır tamamlanmaz çıkartılmalıdır. Aksi taktirde kesim ve boyama aşaması zorlaşacaktır. X–ray incelenmesi ile dekalsifikasyon tamamlanıp tamamlanmadığı kesin olarak karar verilebilir.
Histoloji
-
Endosülfan ve okratoksin-A’nın birlikte sıçanlarda toksisitesi: histopatolojik değişiklikleri
-
Histoloji Pdf Ders Notları
-
DEKALSİFİYE EDİLMEMİŞ KESİTLERİN HAZIRLANIŞI
-
DEKALSİFİKASYONU TEST ETMEK
-
KELATLAMA AJANLARI
-
ELEKTROLİTİK DEKALSİFİKASYON
-
ASİT DEKALSİFİKASYON SIVILARI
-
Histopatoloji nedir ?
-
KEMİK DOKUSU VE DEKALSİFİKASYON
-
MSS’DE DEJENERE MİYELİNİN GÖSTERİMİ
-
MARKSCHE’DEN BOYASI (Spielmayer, Benda)
-
MSS‘DE MİYELİNİN GÖSTERİMİ
-
KARIŞIK OLAN TEKNİK
-
BİELSCHOWSKY TEKNİĞİ
-
GÜMÜŞ ÇÖKTÜRME YÖNTEMLERİ