Biyologlar - Biyolojiye Gerçekçi Yaklaşım

Amino asit dekarboksilaz - dihidrolaz testleri için besiyeri

---

Bir  aminoasidin  dekarboksilasyonu  karboksil  grubunun  amin  ve  CO2 oluşturmak  üzere enzimatik  parçalanmasıdır.  Bazı  bakteriler  aminoasidin  dekarboksilasyonuna  neden  olan enzimlere  (dekarboksilaz)  sahiptirler.  Dekarboksilaz  enzimleri  bir  indikatör  varlığında  renk değişikliği ile basitçe görülebilirler.

Dekarboksilaz aktivitesini saptamak için biz laboratuvarımızda Moeller dekarboksilaz medium kullanılmaktadır. Test edilecek aminoasit bakteri inokülasyonundan önce mediuma eklenir. Tüpler anaerobik olarak inkübe edilir. İnkübasyonun başlangıcında bütün tüpler sarı olabilirse de bunun nedeni ortamdaki çok az glukozun fermentasyonudur. Eğer lizin dekarboksilasyonu oluyorsa alkali aminler oluşmakta ve besiyerindeki indikatör madde olan brom krezol moruna bağlı olarak mor renkte bir görünüm oluşmaktadır.

Moeller dekarboksilaz medium (pH: 6.8)

Bacto pepton                  5 g
Bacto yeast extract         3 g
Bacto dekstroz               1 g
Bacto brom cresol purple    0.02 g
Distile su                      1000 mL

Yukarıdaki  maddeler  tartılıp  121 °C’de  15  dakika  sterilize  edildikten  sonra  test  edilecek  aminoasitten 10 g filtre edilerek eklenmekte ve sonuçta %1’lik konsantrasyonda olmaktadır.

Kaynak:

RSHMB Ulusal Enterik Patojenler Referans Laboratuvarı

---