Biyologlar - Biyolojiye Gerçekçi Yaklaşım

CSM besiyerinin hazırlanması

---

Sodyum glutamat (mono)  10.7 g
L-proline                           0.24 g
NaCl                                 2.5 g
KH2PO4                           0.5 g
KCl                                  0.2 g
MgCl2.6H2O                   0.1 g
CaCl2                             0.02 g
Tris                                 6.1 g
Casamino-acid               0.5 g
Cyclodextrin                   1.0 g
Agar                              15.0 g
Distile su                       975 mL


1 Yukarıdaki maddelerin hepsi 2 L‟lik bir erlene konur.
2 Erlen, manyetik karıştırıcı üzerine oturtulur. Erlen içeriğindeki agar eriyinceye kadar karıştırılır. pH‟sı 7.4‟e ayarlanır.
3 115°C‟de 15 dk otoklavlanır.
4 Aşağıdaki maddeler (1000 mL baz besiyeri için), filtrasyonla steril edilerek ilave edilir. Her biri ayrı ayrı 5‟er mL distile su içinde olacak şekilde;

L-sistein mono hidroklorit     40 mg
FeSO4.7H2O                      10 mg
Askorbik asit                       20 mg
Niasin (nikotinamid)             4 mg
İndirgenmiş glutatyon         150 mg

5 Etiketlenir. Buzdolabında naylon torbada nem kaybı önlenerek saklandığı takdirde raf ömrü 6 aydır.

Besiyerlerinin kalite kontrolü

Besiyerlerinin kalite kontrolü başlıca sterilite, üreme ve seçici özellik kontrollerini kapsar.
1 Sterilite kontrolü - Yeni hazırlanmış her besiyeri lotundan 1 L başına 2-3 plak seçilir; 36°C‟de 3 gün inkübe edilir. Hiçbir kontaminant (bakteri, mantar) ürememiş olmalıdır.
2 Üreme kontrolü - pozitif kontrol suşları (B. pertussis ATCC 9797 ve B. parapertussis ATCC 15311) pasajlanarak üreme değerlendirilir.
3 Seçici özellik kontrolü – C-BGA için Stapylococcus aureus ATCC 25923 inoküle edilir.
Besiyeri kalite kontrolünde daha ayrıntılı bilgi için bkz. UMS, B-MT-02 Difteri, Ek-3 veya UMS, B-MT-06 Lejyoner Hastalığı, Ek-2. Bordetella spp besiyerleri için kalite kontrol suşlarının stokları verilen UMS belgelerinden yararlanılarak benzer şekilde hazırlanabilir, saklanabilir, kullanılabilir ve sonuçlar da benzer şekilde değerlendirilebilir.

---