Fosfatase Testi
Bu test, özellikle, stafilokokların (koagulase pozitif) sentezledikleri fosfatase enzimini belirlemek amacıyla yapılır.
Reaksiyon, ortamda indikatör olarak bulunan fenolftalein difosfat'ı fosfatase enzimi yardımıyla ayrıştırarak serbest fenolftalein meydana getirir. Bu da alkali ile birleşince parlak pembe-kırmızı renk oluşur.
Materyal
1) İçinde, % 0.5 fenolftalein disfofat bulunan agar besi yeri (pH 7.3)
2) Mikroorganizmaların saf ve taze kültürleri
3) Kontrol pozitif (S. aureus) ve negatif (S. epidermidis) suşlarının kültürü
4) Ayıraç (% 40 NaOH solusyonu veya yoğun amonyum hidroksid, NH4OH)
5) Ekilmemiş tüp (kontrol tüp)
Metot
Mikroorganizma kültürlerinden fenolftalein fosfatlı agara ekim yapılır ve 37 °C de 1-2 gün inkube edilir. Bu sürenin sonunda, koloniler amonyak buharına tutulurlar (petri kutusunun kapağına 1 ml NH4OH konur ve kültür ters olarak kapatılır). Eğer sıvı besiyeri kullanılmışsa, tüplere sodyum hidrositten bir damla damlatılır.
Değerlendirme
Kolonilerde veya tüpte kırmızı rengin meydana gelmesi pozitif reaksiyonu gösterir. Negatif durumda renk değişikliği olmaz.
Dikkat edilecek noktalar
Alkali ilavesi çok az veya çok fazla olmamalıdır. Yanlış sonuç verebilir.
02.08. Glukonat Oksidasyon Testi
Bu test, mikroorganizmaların glukonat (glukonik acid) okside edebilme yeteneğini ölçmede kullanılır. Glukonat'ın ayrışması sonu besi yerinde oluşan 2 ketoglukonat, ayrıçla ortaya konulur. Bu deneyden mikroorganizma cinslerini [E. coli (-), Enterobacter (+), Klebsiella (+) ve P. aeruginosa (+)] identifikasyonunda yararlanılır.
Materyal
1) İçinde glukonat (potasyum glukonat, potasyum glukonik asit) bulunan sıvı besi yeri (5 ml tüplerde),
2) Muayene edilecek mikroorganizmalar saf ve taze sıvı kültürleri,
3) Kontrol pozitif (Klebsiella aerogenes) ve negatif (E. coli) kültürleri,
4) Benedict'in ayıracı.
Metot
Mikroorganizmalardan yeteri miktarda glukonatlı besi yerlerine ekilir ve 37 °C de 2-3 gün inkübe edilirler. Bu sürenin sonunda kültürlere Benedict ayıracından 1 ml konur ve iyice karıştırılırlar. Sonra 100 °C de su banyosunda 10 dakika bekletildikten sonra okunur.
Değerlendirme
Tüplerde kahverengi - esmer renkte bir presipitasyonun meydana gelmesi pozitif reaksiyon olarak değerlendirilir. Negatif olgularda ayıracın renginde (mavi) bir değişiklik olamaz. Meydana gelen presipitat genellikle renksiz bir görünümdedir.
Mikrobiyoloji Laboratuvarı
-
Ehrlich-Ziehl-Neelsen (EZN) Boyama Yöntemi Nedir?
-
Mantarların Boyanması
-
Laktofenol Pamuk Mavisi Boya Solüsyonun Hazırlanışı
-
Flagella Boya Solüsyonun Hazırlanışı
-
Bakterilerde Kirpik Boyama İçin Preparat Hazırlanması
-
Spor Boyama Solüsyonlarının Hazırlanması
-
Schaffer Fulton Yöntemi ile Spor Boyama
-
Ehrlich – Ziehl – Neelson Boyamada Kullanılan Solüsyonlarının Hazırlanışı
-
EHRLICH - ZIEHL-NEELSEN BOYAMA YÖNTEMI
-
Besiyeri Hazırlamada Kullanılan Araç Gereçler Nelerdir?
-
Karbonhidrat Fermantasyon besiyeri formül ve hazırlanış bilgileri
-
TSİ (Üç şekerli Demirli Agar) besiyeri formül ve hazırlanış bilgileri
-
Çikolata Agar Besiyeri formül ve hazırlanış bilgileri
-
Kanlı Agar Besiyeri formül ve hazırlanış bilgileri
-
Löwenstein- Jensen Besiyeri formül ve hazırlanış bilgileri