KEMİK VE KEMİK İLİĞİNİN BOYANMASI
Erlich Hematoksilen, kıkırdağın heteropolisakkarit içeriğini ve kemiğin sement çizgilerini, nukleusları boyamaktadır. Eozin zıt boyası ile birlikte kemik histolojisinde rutin yöntemdir. Ancak, Erlich hematoksileni Paget hastalığında sement çizgilerinin karekteristik ya¬pısını göstermede özel bir değeri varsa da, kıkırdak-şekillenen tümörlerdeki bazofil materyelin kuvvetli boyanması bazen nüklear ayrıntıyı baskılıyabilir. Böyle vakalarda Gole, Mayer veya Harris hematoksilenini kullanmak tercih edilebilir. EDTA'ta dekalsifiye edilen kemiğin hematoksilen ile uzun süre boyanmasına gerek yoktur ancak kuvvetli asit solüsyonlarda uzun süre dekalsifiye edilen materyel normal boyama süresinde boyanamayabilir. Böyle durumlarda, daha uzun boyama (distile suda 1:5 oranında seyreltilmiş hematoksilende 16-24 saat), demir hemateksilenin kullanımı veya celestine blue-hemalum boya sırası yararlı olabilir. Asitle dekalsifiye edilmiş doku eozini çok fazla alır ve solüs¬yonun seyreltilmesi veya boyadan sonra uzun süre yıkama, kollajenin, olgun kemik ve osteoidin differansiyel boyamasını sağlamak için gerek¬li olabilir.
1- Metacrylat Kesitler İçin Hematoksilen-Eozin Boyaması
Kesitleri % 70'lik alkolden distile suya aktarılır.
Gole hematoksileni ile 60 dakika boyanır.
Çeşme suyunda iyice yıkanır.
% 1'lik sulu eozinde 30 dakika boyanır.
Osteoid pembe, kalsifiye kemik koyu morumsu kahverengini alana kadar çeşme suyunda differansiye edilir.
Kesitler, % 70, % 90 ve absolü alkolden geçirerek sudan kurtarılır.
Kesitler Euparal'a aktarılır.
Kesitleri bir lama alınarak kesitler üzerine düz sert kağıt şeri¬t uygulanır. Kağıt üzerinde bir cam çubuğu yuvarlayarak buruşukları açılır. Kağıt soyarak kaldırılır.
Euparal'da kapatılır. Lam üzerine kesitin düzleşmesi için küçük bir ağırlık konur.
Sonuçlar:
Osteoid........................pembe .
Kalsifiye kemik.............morumsu kahverengi
Çekirdekler...................mavi
Eritrositler........... .........genellikle boyanmadan kalır
2-Diğer Teknikler
Matrajt ve Hioco (1966) nın solochrome cyanin yöntemi osteoid dokunun turuncu-kırmızı, kalsifiye kemiğin ise parlak mavi boyandığı bir yöntemdir. Masson' un trikrom boyası, dekalsifiye edilmemiş plastiğe gömülmüş kemik kesitleri ile ilginç sonuçlar vermektedir. Osteoid doku parlak kırmızı ve uygulanan fibril boyasına göre mavi veya yeşil kemik matriksi boyanmaktadır. Dekalsifiye edilmiş kemiğin parafin kesitlerinden genellikle elde edilen boyama sonuçlarının tersidir. Bunun nedeni ise bilinmemektedir. Bağ dokusu boyaları, kemik ve olgun kemiğin kollajen matriksini çift kırıcı yaptığından yararlıdır aynı zamanda çift kırıcılık polarize ışık ile boyanmamış kesitlerde de güzel görünebilmektedir. Selüloz nitrat ve frozen kesitler, Van Gieson'un pikro-fuksin boyası kemiği parlak kırmızı boyarken, Masson trikrom boyası uygulanan fibril boyasına bağlı olarak mavi veya yeşil boyamaktadır. Parafin kesitlerde Masson ve benzer yöntemler daha az değerlidir. Kemik matriks boyanması ya plazma boyası ile ya da fibril boyası ile veya her ¬ikisinin karışımı ile değişkendir. Pratikte Van Gieson boyası daha ya¬rarlıdır ve sıklıkla parlak kırmızı boyanan osteoid ve trabeküler ve olgun kemiğin sarımsı-pembe boyanması ile kolaylıkla ayırtetmek mümkündür. Retiküler fibriller için gümüş çöktürme yöntemleri, modifikasyonsuz kemik kesitlerine uygulanabilir. Sement çizgilerine gümüş çökmez ve tonlanmamış preperatlardaki kemik matriksinin kahverenkli boyasına karşı negatif olarak görülmektedir. PAS Yönteminin kemik patolojisinde önemi vardır; süngerimsi kemik daima kuvvetli pozitif iken osteoid ve lamellar kemik negatiftir. Kemik laküna ve kanalikülleri Schmorl yöntemi ile gösterilebilir. En iyi sonuçlar selüloz nitrat veya frozen kesitlerle elde edilir. Bu¬nun da nedeni yöntemin prensibinin bazik boyanın (thionin) pikrik asit¬le dar kanallara ve boşluklara çökmesi olabilir. Bu kesitler daha az büzülür ve parafin kesitlerden daha fazla granülün çökmesine izin verir.
Histoloji
-
Endosülfan ve okratoksin-A’nın birlikte sıçanlarda toksisitesi: histopatolojik değişiklikleri
-
Histoloji Pdf Ders Notları
-
DEKALSİFİYE EDİLMEMİŞ KESİTLERİN HAZIRLANIŞI
-
DEKALSİFİKASYONU TEST ETMEK
-
KELATLAMA AJANLARI
-
ELEKTROLİTİK DEKALSİFİKASYON
-
ASİT DEKALSİFİKASYON SIVILARI
-
Histopatoloji nedir ?
-
KEMİK DOKUSU VE DEKALSİFİKASYON
-
MSS’DE DEJENERE MİYELİNİN GÖSTERİMİ
-
MARKSCHE’DEN BOYASI (Spielmayer, Benda)
-
MSS‘DE MİYELİNİN GÖSTERİMİ
-
KARIŞIK OLAN TEKNİK
-
BİELSCHOWSKY TEKNİĞİ
-
GÜMÜŞ ÇÖKTÜRME YÖNTEMLERİ