Biyologlar - Biyolojiye Gerçekçi Yaklaşım

Löwenstein- Jensen Besiyeri formül ve hazırlanış bilgileri

---

a- Mineral Tuz çözeltisini

KH2PO4 ( potassium phospohate mono-basic) ----2.4 gr
Magnezyum sitrat------------------------------0.6 gr
Magneyum sulfat ( MgSO4. 7 H2O)---------------0.24 gr
L- Asparagine---------------------------------3.6 gr
Gliserol--------------------------------------12 ml
Distile su------------------------------------600 ml
- Bir balon içerisine tüm malzemeler konulur. 100 °C'da 30 dakika bekletilerek tuzların tamamen çözünmesi sağlanır. 121°C‟da 20 dakika steril edilir. Oda sıcaklığına ulaşacak şekilde soğutulur.

b-% 2 „lik Malaşit YeĢili Çözeltisinin Hazırlanması

Malaşit yeşili -------------2 gr
Distile su------------------100 ml

- Malaşit yeşili tartılır. Distile suda çözünür. Kullanıma kadar renkli çözelti saklama kaplarında saklanır.

c- Homojenize yumurta emülsyonu hazırlama

Hazırlanışı:

- Yumurtaların kabuğu musluk suyunda fırça yardımı ile temizlenir.
- Bir sepet içerisinde kurutulur.
- %70 alkol emdirilmiş pamuklu kumaşla yumurtanın dış yüzeyi ovulur ve yumurtayı kırmadan önce alkolün kuruması beklenir.
- Yumurtalar tek tek kırılır ve içerisinin taze olup olmadığı görülebilmesi için petri kutusuna akıtılır. Yumurta sarısı bütünlüğü bozulmuş ve /veya kötü koku oluşmuş ise yenisi ile değştirilir.
- Steril bir penset yardımı ile yumurta sarısına yapışmış zarların ayrılması sağlanır. Yumurta sarısı bir beher veya balon joje içerisine konur.
- Yumurta sıvısını yapıĢkan özelliği kayboluncaya kadar çalkalanır.
- Bu amaçla içinde cam boncuk bulunan erlenmayer-balon veya elektrikli mikser kullanılabilir.

LÖWENSTEİN – JENSEN BESİYERİNİN HAZIRLANIŞI

Mineral tuz solüsyonu------------------600 ml
%2‟lik malaĢit yeĢili çözeltisi--------20 ml
Homojenize yumurta karışımı------------25 adet

Hazırlanışı:

- Steril bir erlenmayer veya balon joje içerisinde hazırlanan tuz solüsyonu, haırlanan %2'lik malaşit yeşili ve hazırlanan homojenize yumurta sıvısı konur.
- Yüzeyde oluşmuş hava kabarcıklarını uzaklaştırmak için 30 dakika bekletilir. Ham besiyerinin rengi açık yeşilden koyu yeşile kadar değişebilir.
- Hazırlanan karışım, hava kabarcığı oluşmayacak şekilde tüplerin yan duvarı boyunca 6'şar ml dağıtılır.
- Tüpler özel hazırlanmış tablalara veya koagülatör godelerine yarıyatık olarak yerleştirilir. Hava kabarcıkları varsa kabarcıkları kayboluncaya kadar tüpler hafifçe çalkalanır.
- Tüpler, koagülatöre yerleştirildikten sonra 78-80 °C'da 1 saat koagüle edilir.
- Koagülasyondan sonra tüpler, oda sıcaklığına gelince koagülatörden alınır
- Tüplerin üzerine besiyerinin; adı, imal tarihini içeren etiketler yapıştırılır.
- Dik olarak buzdolabında saklanır.

---