Biyologlar - Biyolojiye Gerçekçi Yaklaşım

Pirazinamidaz (PYZ) testi

---

Reaktifler
Pirazinamid solüsyonu

• Pirazinamid distile suda 2 mg/mL olacak şekilde hazırlanır
• 0.45 μm membran filtreden geçirilerek steril edilir.
• Steril burgu kapaklı derin dondurucu tüplerine tevzi edilir.
• -20°C‘de saklanır.

PYZ reaktifi (ferroz amonyum sülfat)

• %20‘lik (2 g ferroz amonyum sülfat, 10 mL steril distile suda) olacak şekilde hazırlanır.
• -20°C‘de saklanır.

Güvenlik uyarısı!

Pirazinamid toz formunda tehlikelidir! Deriye temas etmemeli ve solunmamalıdır!


Kontrol suşları

•  Pozitif kontrol - C. xerosis NCTC 12078
• Negatif kontrol - C. ulcerans NCTC 12077

PYZ testinin yapılışı

1 Üç adet steril tüpe 0.25 mL Pirazinamid solüsyonu dağıtılır.
2 Tüplerden birinde test kökeninin yoğun bulanık süspansiyonu (McFarland No 8)
hazırlanır. Diğer iki tüpte ise pozitif ve negatif kontrol süspansiyonları hazırlanır.
3 37°C‘da 4 saat veya bir gece inkübe edilir.
4 İnkübasyondan sonra her süspansiyona birer damla PYZ reaktifi eklenir.
5 Oda sıcaklığında 1-5 dk beklenir.
6 Test tüpü pozitif ve negatif kontrol tüpleri ile karşılaştırılır.

Yorum

1 Pozitif tüpte bulanık/paslı pembe bir renk oluşumu gözlenmelidir.
2 Negatif tüpte değişiklik olmaz.
3 Sonuç:
Negatif ise - C. diphtheriae, C. ulcerans veya C. pseudotuberculosis
Pozitif ise - diğer Corynebacteria spp

---